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中山大學(xué)顏光美團(tuán)隊(duì)病毒一種可以“殺死癌癥”的病毒，三年前在全球首次發(fā)現(xiàn)時(shí)引發(fā)轟動(dòng)?，F(xiàn)在，這種抗癌新藥“溶瘤病毒M1”的研究有了最新進(jìn)展。
胡駿副教授和邱鵬新研究員，在食蟹猴模型中進(jìn)行溶瘤病毒M1安全性評(píng)估。
中山大學(xué)顏光美的團(tuán)隊(duì)，昨日向外界公布“溶瘤病毒M1”的最新進(jìn)展。
一種可以“殺死癌癥”的病毒，三年前在全球首次發(fā)現(xiàn)時(shí)引發(fā)轟動(dòng)?，F(xiàn)在，這種抗癌新藥“溶瘤病毒M1”的研究有了最新進(jìn)展。中山大學(xué)藥理學(xué)教授顏光美的團(tuán)隊(duì)稱，不僅在猴子這一非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物身上證實(shí)了M1病毒的安全性，還發(fā)現(xiàn)和其他藥物聯(lián)用讓M1增效的機(jī)制。顏光美還帶來(lái)了臨床試驗(yàn)的最新消息，“預(yù)計(jì)2018年可以進(jìn)行M1病毒的臨床試驗(yàn)。”
或可享受綠色通道
藥物有望快速進(jìn)入臨床試驗(yàn)
2014年，顏光美的實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)在全球內(nèi)首次發(fā)現(xiàn)，在自然界存在的病毒M1具有選擇性殺傷多種腫瘤細(xì)胞的特性。這種在海南蚊蟲上發(fā)現(xiàn)的病毒，只在馬和豬之間傳播，但被團(tuán)隊(duì)證實(shí)，可以鉆入癌細(xì)胞體內(nèi)，通過擴(kuò)增裂解方式殺傷腫瘤細(xì)胞，“以毒攻毒”。
顏光美團(tuán)隊(duì)在小鼠和人體腫瘤組織上進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)顯示，M1對(duì)肝癌、結(jié)直腸癌、膀胱癌細(xì)胞的殺傷作用最明顯，對(duì)黑色素瘤、腦癌和前列腺癌等癌細(xì)胞也起作用。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，M1病毒對(duì)體外培養(yǎng)的部分人類癌癥細(xì)胞，抑制率高達(dá)90%；對(duì)腫瘤模型小鼠體內(nèi)的癌細(xì)胞，抑制率達(dá)50%-60%.他們還對(duì)臨床病例中切除下來(lái)的腫瘤組織進(jìn)行實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，對(duì)敏感病例的癌組織的抑制率達(dá)60%-70%.所謂抑制率，指的是M 1病毒殺死腫瘤或抑制腫瘤增殖的比率。論文發(fā)表在2014年10月2日的《美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院刊》上，經(jīng)國(guó)內(nèi)媒體報(bào)道后，引起轟動(dòng)。
又是三年，顏光美說，自2014年研究被報(bào)道伊始，每個(gè)星期，都有患者發(fā)來(lái)郵件，希望使用病毒制劑，或是詢問研究進(jìn)度。來(lái)自齊齊哈爾的一家四口人，甚至直接登門拜訪。顏光美盡量一一回復(fù)，“我很理解，親人得了癌癥，是什么樣的心情。人的精神向往會(huì)產(chǎn)生很大的作用，有了期待，也許病人就能等到那一天。”
除了患者，這項(xiàng)研究也得到了省領(lǐng)導(dǎo)的關(guān)注。溶瘤病毒M 1的臨床轉(zhuǎn)化研究，還獲得國(guó)家“十三五”重大新藥創(chuàng)制科技重大專項(xiàng)資金的支持。在這些支持下，溶瘤病毒M 1將可能享受綠色通道以更快的速度進(jìn)入臨床試驗(yàn)?，F(xiàn)階段，顏光美教授課題組正在緊鑼密鼓地進(jìn)行新藥申報(bào)前的臨床前研究，他說，有望2018年申請(qǐng)臨床試驗(yàn)批件，正式進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，屆時(shí)，部分受試患者就能最先注射到這一藥物。
抗癌新藥研發(fā)已走了一半
“最終療效要用臨床說話”
“整個(gè)研究還算順利，除了睡著的幾個(gè)小時(shí)沒考慮（這項(xiàng)研究），其他時(shí)間都在考慮。”今年顏光美已有60歲，因?yàn)槟挲g原因，他退出了中山大學(xué)副校長(zhǎng)這一領(lǐng)導(dǎo)崗位，有媒體希望專訪他，被拒絕了。“我說自己主要的興趣在研究上，如果有了科研進(jìn)展，我會(huì)跟大家溝通。”
獲得了眾多關(guān)注的目光，讓顏光美更加珍惜時(shí)間，退下來(lái)后，顏光美一天都沒休息過。團(tuán)隊(duì)的成員凌晨一兩點(diǎn)，可能也會(huì)接到他的微信。但顏光美很欣喜，因?yàn)楝F(xiàn)在精力很集中，“100%花在研究工作上，這兩三月研究的進(jìn)展特別快，這是我特別覺得高興的事情。如果有機(jī)會(huì)做成新藥，那是非常幸運(yùn)的。”
這幾年來(lái)的科研進(jìn)展和技術(shù)突破，讓顏光美充滿信心，如果把研發(fā)抗癌新藥的過程比作10公里長(zhǎng)跑，2014年，顏光美接受南都記者采訪時(shí)認(rèn)為，團(tuán)隊(duì)才順利跑完了第一公里，而現(xiàn)在，“比較穩(wěn)健地說，已經(jīng)走完一半了。感覺已經(jīng)沒有跨不過去的技術(shù)門檻，做成了不是問題，沒做成功那才是問題。”
但對(duì)于將來(lái)藥物臨床使用可能達(dá)到的效果，顏光美始終持審慎態(tài)度，“最終一定要用臨床治療來(lái)說話，現(xiàn)在動(dòng)物試驗(yàn)做得再漂亮，也只是動(dòng)物試驗(yàn)，一定要病人試了才知道，如果再往前講，就過線了。”但顏光美認(rèn)為，該藥物研發(fā)最低的要求、最基本的期待是“延長(zhǎng)腫瘤患者的生存期”。
背景
M1病毒曾被封存40年
M1病毒的發(fā)現(xiàn)可以追溯至上世紀(jì)60年代。1964年，一群科學(xué)家在海南島“抓獲”了50只蚊子，從這些蚊子體內(nèi)，他們分離出了這種病毒。他們發(fā)現(xiàn)，M1除了在馬和豬身上會(huì)引起非常輕微的類似感冒的癥狀，對(duì)人和絕大多數(shù)動(dòng)物都幾乎沒有致病性。于是，這群科學(xué)家對(duì)M1喪失了興趣，病毒被封存。
2004年，當(dāng)時(shí)正在做博士論文的胡駿在一次實(shí)驗(yàn)中偶然發(fā)現(xiàn)，M1病毒可以將大鼠來(lái)源的膠質(zhì)瘤細(xì)胞溶解掉。
2009年，在《細(xì)胞周期》（Cell Cycle）上，顏光美與胡駿發(fā)表了論文，報(bào)告了他們?cè)贛1病毒身上的新發(fā)現(xiàn)———這種病毒在體外試驗(yàn)中能夠殺滅癌細(xì)胞。2014年發(fā)表在《美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院刊》上的論文，經(jīng)國(guó)內(nèi)媒體報(bào)道后，引起轟動(dòng)。
溶瘤病毒是一類具有復(fù)制能力的腫瘤殺傷型病毒，M1病毒也是其中之一。近幾十年來(lái)，溶瘤病毒治療引起了廣泛關(guān)注。世界上最早關(guān)于溶瘤病毒的報(bào)道出現(xiàn)在上世紀(jì)50年代，當(dāng)時(shí)發(fā)現(xiàn)一名子宮頸癌患者在感染狂犬病病毒后，腫瘤隨之消退。
幾十年間，溶瘤病毒在美國(guó)得到重視和大量研究，美國(guó)Amgen公司的溶瘤病毒免疫治療藥物T-Vec已經(jīng)上市。
“研究也提示其他溶瘤病毒，可以試著跟腫瘤藥物聯(lián)用，進(jìn)行增效。”顏光美說。
本報(bào)訊“女孩鼻子貼膠布被逐出機(jī)艙”事件持續(xù)發(fā)酵后，8月16日，19歲的當(dāng)事人寧波女孩小項(xiàng)，情緒有點(diǎn)不穩(wěn)定，一些網(wǎng)友認(rèn)……
揭秘
A
一年多住在猴廠不定期給食蟹猴注射M1
自然界存在的病毒中，只有一小部分會(huì)讓人體致病。團(tuán)隊(duì)通過體外細(xì)胞系和小動(dòng)物模型上證實(shí)，M 1病毒雖然可以攻破腫瘤的防線，但對(duì)正常細(xì)胞并沒有損傷作用。
但病毒是否會(huì)對(duì)人體有毒副作用？在2014年成果公布后，團(tuán)隊(duì)緊鑼密鼓挑選了“最接近人類”的非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物食蟹猴進(jìn)行驗(yàn)證。團(tuán)隊(duì)成員、中山大學(xué)副教授胡駿在肇慶找到了合適的實(shí)驗(yàn)猴廠，這里既能給猴子做B超，還能做CT、核磁共振（M R I），“廣州醫(yī)院也有核磁共振，但猴子去做肯定不方便。”
接下來(lái)的兩年里，胡駿有一半時(shí)間就住在山上的猴廠，不定期地給食蟹猴靜脈注射了18次溶瘤病毒M 1，密切記錄食蟹猴的日常行為表現(xiàn)、生化指標(biāo)和重要器官的影像結(jié)果。“在這個(gè)過程中，每天也提心吊膽，每次檢查結(jié)果出來(lái)就趕緊去看。”胡駿說。數(shù)據(jù)結(jié)果讓人欣喜：在觀察的半年時(shí)間內(nèi)，食蟹猴都沒有出現(xiàn)任何不良臨床反應(yīng)，核磁共振檢查也未發(fā)現(xiàn)任何器官出現(xiàn)損害。
為什么是18次？顏光美說，因?yàn)榕路磸?fù)注射引起人體過敏反應(yīng)等副作用，因此在食蟹猴身上注射了多次，“如果一個(gè)療程使用6次，那我們打18次，看會(huì)不會(huì)有影響。”“在猴子身上是安全的，在人身上有很大的機(jī)會(huì)也是安全的。這個(gè)結(jié)果強(qiáng)烈提示，M 1病毒具有良好的安全性，為將來(lái)M 1病毒在臨床的應(yīng)用提供了保障。”顏光美說。這一成果也于2016年6月22日，發(fā)表在基因治療領(lǐng)域的權(quán)威期刊《人類基因治療》。
B
M1病毒使用增效劑后抗腫瘤活性提高3600倍
除了驗(yàn)證M 1病毒的安全性，顏光美也在考慮另一個(gè)問題：抗癌藥物研發(fā)已有200年歷史，針對(duì)各種癌癥的藥物達(dá)數(shù)百種之多，知識(shí)有一個(gè)繼承關(guān)系，M 1病毒和現(xiàn)有的抗癌藥物有無(wú)協(xié)同作用？為此，團(tuán)隊(duì)的博士張海鵬帶領(lǐng)另外三位博士，挑選了350種有代表性的小分子靶向藥物，篩選了8個(gè)月。
在對(duì)比后，張海鵬等人逐漸縮小范圍，并定格到一類靶向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)降解通路（ER AD）的抗癌藥物，它適用于多發(fā)性骨髓瘤和多種晚期實(shí)體瘤。課題組在小鼠的肝臟上注射人肝癌細(xì)胞，建立了原位肝癌模型，并對(duì)小鼠注射低劑量的溶瘤病毒和E R A D抑制劑，結(jié)果顯示，小鼠的生存期延長(zhǎng)了一倍以上。單獨(dú)使用低劑量M 1病毒攻擊，腫瘤模型小鼠體內(nèi)的癌細(xì)胞，抑制率為23.6%.而在用了增效劑后，抑制率提高至72.3%.
臨床腫瘤手術(shù)標(biāo)本的離體培養(yǎng)組織上，這一聯(lián)合應(yīng)用的效果也得到驗(yàn)證。并且，此聯(lián)合療法在食蟹猴模型上沒有引起不良反應(yīng)。不止如此。這一抗癌藥物能顯著增強(qiáng)M 1病毒的抗腫瘤活性，增幅高達(dá)3600倍。“比如，以前用1個(gè)病毒可以殺傷1個(gè)腫瘤細(xì)胞，現(xiàn)在能殺傷3600個(gè)。”“溶瘤病毒M1是自動(dòng)鎖定腫瘤細(xì)胞的制導(dǎo)導(dǎo)彈，而E R A D抑制劑的加入，如同在導(dǎo)彈上綁定了自帶篩選功能的烈性炸藥包，強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)手，效果不言自明。”顏光美說，這也給研究帶來(lái)了新思路，病毒M 1除了“單打獨(dú)斗”外，也可以和別的藥物聯(lián)用提高療效。
有意思的是，兩種藥物是否應(yīng)該搭配應(yīng)用于病人，“有據(jù)可循”。“通過檢測(cè)E R A D通路中一個(gè)叫做V CP的蛋白質(zhì)來(lái)預(yù)測(cè)。”張海鵬解釋，具體來(lái)說，如果腫瘤組織上的V CP蛋白高表達(dá)，提示病人適合溶瘤病毒M 1和ER A D抑制劑聯(lián)合方案，如若低表達(dá)，則代表不適合。讓人興奮的是，在肝癌病人中，腫瘤組織高表達(dá)V C P是很常見的。該治療方案將給難治的肝癌帶來(lái)新希望。但張海鵬說，不只是肝癌，該方案對(duì)膀胱癌、結(jié)直腸癌也有顯著的增效作用，“不同的腫瘤或許可以篩選出不同的增效劑。”這一研究成果也在2017年8月24日凌晨發(fā)表在國(guó)際上轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的權(quán)威期刊《科學(xué)·轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)》。
C
溶瘤病毒M1可以引發(fā)腫瘤細(xì)胞“內(nèi)斗”
在研究過程中，團(tuán)隊(duì)博士生蔡靜偶然的新發(fā)現(xiàn)，破解了另一謎題。在一次做實(shí)驗(yàn)時(shí)，蔡靜用標(biāo)記上紅色熒光的M 1病毒感染腫瘤細(xì)胞，感染后，如果細(xì)胞帶有紅色標(biāo)記，說明感染上了病毒。隨后，她對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行“凋亡染色”，發(fā)現(xiàn)一個(gè)有意思的現(xiàn)象：被感染的腫瘤細(xì)胞周圍，有很多旁邊的腫瘤細(xì)胞沒有紅色標(biāo)記，即沒有感染M 1病毒，但也發(fā)生了死亡。
是誰(shuí)殺死了這些旁邊的腫瘤細(xì)胞？隨后的兩年多時(shí)間里，蔡靜專注破解這一難題。最終她發(fā)現(xiàn)，M 1病毒居然可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞，釋放具有細(xì)胞毒性的因子，進(jìn)而殺傷這些細(xì)胞周圍尚未感染M 1的腫瘤細(xì)胞。這是一種非常有趣的現(xiàn)象，學(xué)術(shù)界稱之為“旁觀者效應(yīng)”，意為處于感染細(xì)胞周圍的旁觀細(xì)胞遭受殺滅。
而且，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，30%癌細(xì)胞是被M 1病毒殺死的，而剩下的70%，均是被癌細(xì)胞放出的因子殺死的。顏光美如是解析這一現(xiàn)象：病毒要在活細(xì)胞里生存，如果試著從腫瘤細(xì)胞的角度來(lái)理解這種行為，可以發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞在受到溶瘤病毒脅迫時(shí)，似乎抱著一種“斷臂求生”的心態(tài)釋放信號(hào)，殺滅周圍的細(xì)胞，讓病毒無(wú)法靠近，以保全遠(yuǎn)端的腫瘤細(xì)胞。這一創(chuàng)新性的成果，于2017年6月27日發(fā)表在國(guó)際上具有很高影響力的權(quán)威期刊《美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院刊》。
釋疑
新藥離上市還有多久？
已制備注射制劑，上市時(shí)間尚無(wú)法預(yù)估
按照法律規(guī)定，新藥研發(fā)需通過科學(xué)研究，臨床前，用于人體的一、二、三期臨床試驗(yàn)等階段，才可以上市銷售，用于臨床治療患者。一期臨床試驗(yàn)考查藥物的安全性，二期考查藥物的有效性，三期試驗(yàn)用數(shù)量更多的實(shí)驗(yàn)樣本進(jìn)一步研究，上市后還要在臨床中進(jìn)行大規(guī)模的研究，驗(yàn)證藥效。
顏光美說，目前，團(tuán)隊(duì)研發(fā)藥物的工藝技術(shù)難題已經(jīng)解決，M 1病毒經(jīng)過發(fā)酵、純化的步驟后，最后將制成凍干粉，成為靜脈注射的制劑。國(guó)際上現(xiàn)行使用的溶瘤病毒注射液，需要將溶液冷凍到負(fù)80℃，運(yùn)輸受到限制。而制成凍干粉，可以放置在2℃-8℃環(huán)境當(dāng)中，普通冰箱即可保存，使用很方便。顏光美說，藥物純化是極為艱難的步驟，不少研發(fā)藥物走到這一步后，止步不前。“打通了這個(gè)技術(shù)關(guān)節(jié)，我扎扎實(shí)實(shí)高興了好幾天。”
目前，團(tuán)隊(duì)正在進(jìn)行新藥申報(bào)前的臨床前研究，預(yù)計(jì)2018年可以進(jìn)行M 1病毒的臨床實(shí)驗(yàn)，屆時(shí)，藥物將可在病人身上進(jìn)行首試。“做完一期試驗(yàn)，最快需要一年時(shí)間。”顏光美說，新藥審批需要多長(zhǎng)時(shí)間，“這不是我能決定的，時(shí)間還沒辦法預(yù)估。”
病毒是否對(duì)所有腫瘤有效果？
11種癌癥均有不同抑制效果
顏光美說，今年3月，美國(guó)FDA批了一類抗癌生物標(biāo)志物，如果多種癌癥都具有這個(gè)生物標(biāo)志物的話，則可被批準(zhǔn)治療。“這是未來(lái)抗癌藥物發(fā)展的新方向，這就是我們計(jì)劃做的。”
目前研究顯示，溶瘤病毒M 1對(duì)10種高發(fā)癌癥（肺癌，肝癌，結(jié)直腸癌，乳腺癌，胰腺癌，前列腺癌，宮頸癌，膠質(zhì)瘤，鼻咽癌，胃癌），以及廣東高發(fā)的鼻咽癌都有不同程度的抑制作用。
此前，該團(tuán)隊(duì)已找到M 1病毒靶向殺傷癌細(xì)胞的特征物———鋅指抗病毒蛋白（ZAP）。目前，針對(duì)ZA P的診斷試劑盒已在報(bào)批，VCP的診斷試劑盒已準(zhǔn)備委托公司研發(fā)。
如若新藥成功研發(fā)，這11種腫瘤病人可以先通過檢測(cè)，確定體內(nèi)癌細(xì)胞缺乏ZA P，便可以進(jìn)行溶瘤病毒M 1治療。如果V CP蛋白高表達(dá)，病人則適合溶瘤病毒M 1和ERA D抑制劑聯(lián)合方案。
出品：南方都市報(bào)科學(xué)新聞工作室
